基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和實驗驗證分析雞血藤治療卵巢癌的分子機制
| 論文作者 | 朱時純, 蔡俊, 吳承玉?, 程春松? |
| 刊物 | 中國中藥雜志 |
| 卷頁 | 第47卷第3期 |
| 摘要 | 通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對接及體外細胞實驗,對雞血藤Spatholobi Caulis 治療卵巢癌(ovarian cancer,OC)的主要活性成分及其潛在的作用機制進行探討。運用中藥藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫與分析平臺(TCMSP)獲取雞血藤的主要活性成分及其預(yù)測靶點,通過GeneCards、OMIM、PharmGkb、TTD、DrugBank 數(shù)據(jù)庫檢索獲得疾病基因。將疾病及藥物預(yù)測靶點進行交集處理,篩選出共同的潛在治療靶點。運用Cytoscape 3. 7. 1 軟件構(gòu)建“藥物-成分-疾病-靶點”相互作用網(wǎng)絡(luò)圖;運用STRING 數(shù)據(jù)庫構(gòu)建蛋白相互作用的PPI 網(wǎng)絡(luò)。運用R 4. 0. 5 進行GO 與KEGG 功能富集分析。分析對接虛擬篩選的處理和優(yōu)化由Schr?dingerMaestro 軟件完成。該研究篩選出雞血藤23 個活性成分,涉及75 個卵巢癌靶點及178 個相關(guān)信號通路;網(wǎng)絡(luò)分析結(jié)果表明雞血藤可能通過作用于GSK-3β、Bcl-2、Bax 等關(guān)鍵靶點,發(fā)揮抗卵巢癌作用;分子對接結(jié)果顯示GSK-3β 與活性成分櫻黃素結(jié)合活性較好。最后體外實驗將篩選出的雞血藤活性成分櫻黃素對人卵巢癌細胞SKOV3 進行核心靶點和通路的初步驗證。采用CCK-8 法檢測細胞增殖情況,使用流式細胞儀檢測櫻黃素對人卵巢癌細胞SKOV3 凋亡的影響。運用Western blot 法檢測櫻黃素靶點及相關(guān)調(diào)控蛋白的表達。體外細胞實驗證明,櫻黃素對卵巢癌細胞的增殖有明顯的抑制作用,并且櫻黃素對SKOV3 有誘導(dǎo)凋亡的作用。Western blot 實驗結(jié)果表明,櫻黃素可以通過抑制GSK-3β 磷酸化的發(fā)生,調(diào)控下游Bcl-2、Bax 蛋白的表達,誘導(dǎo)SKOV3 細胞凋亡的發(fā)生。該研究揭示了網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)預(yù)測并指導(dǎo)實驗設(shè)計的科學(xué)性,證實櫻黃素可通過阻斷GSK-3β / Bcl-2/ Bax 細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路治療卵巢癌,為雞血藤治療卵巢癌的機制研究提供依據(jù)。 |
