基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證分析雞血藤治療卵巢癌的分子機(jī)制

刊物

中國(guó)中藥雜志

刊號(hào)

1001-5302,CN 11-2272/R

摘要

通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對(duì)接及體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，對(duì)雞血藤 Spatholobi Caulis 治療卵巢癌（ovarian cancer，OC）的 主要活性成分及其潛在的作用機(jī)制進(jìn)行探討。運(yùn)用中藥藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)與分析平臺(tái)（TCMSP）獲取雞血藤的主要活性成 分及其預(yù)測(cè)靶點(diǎn)，通過(guò) GeneCards、OMIM、PharmGkb、TTD、DrugBank 數(shù)據(jù)庫(kù)檢索獲得疾病基因。將疾病及藥物預(yù) 測(cè)靶點(diǎn)進(jìn)行交集處理，篩選出共同的潛在治療靶點(diǎn)。運(yùn)用 Cytoscape 3.7.1 軟件構(gòu)建“藥物-成分-疾病-靶點(diǎn)”相互作用網(wǎng) 絡(luò)圖；運(yùn)用 STRING 數(shù)據(jù)庫(kù)構(gòu)建蛋白相互作的 PPI 網(wǎng)絡(luò)。運(yùn)用 Rversion 4.0.5 進(jìn)行 GO 與 KEGG 功能富集分析。分析 對(duì)接虛擬篩選的處理和優(yōu)化由 Schr?dinger Maestro 軟件完成。該研究篩選出雞血藤 23 個(gè)活性成分，涉及 75 個(gè)卵巢癌 靶點(diǎn)及 178 個(gè)相關(guān)信號(hào)通路；網(wǎng)絡(luò)分析結(jié)果表明雞血藤可能通過(guò)作用于 GSK3β、Bcl-2、Bax 等關(guān)鍵靶點(diǎn)，發(fā)揮抗卵 巢癌作用；分子對(duì)接結(jié)果顯示 GSK3β 與活性成分櫻黃素結(jié)合活性較好。最后體外實(shí)驗(yàn)將篩選出的雞血藤活性成分櫻 黃素對(duì)人卵巢癌細(xì)胞 SKOV3 進(jìn)行核心靶點(diǎn)和通路的初步驗(yàn)證。采用 CCK-8 法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況，使用流式細(xì)胞儀檢 測(cè)櫻黃素對(duì)人卵巢癌細(xì)胞 SKOV3 凋亡的影響。運(yùn)用 Western blot 法檢測(cè)櫻黃素靶點(diǎn)及相關(guān)調(diào)控蛋白的表達(dá)。體外細(xì) 胞實(shí)驗(yàn)證明，櫻黃素對(duì)卵巢癌細(xì)胞的增殖有明顯的抑制作用，并且櫻黃素對(duì) SKOV3 有誘導(dǎo)凋亡的作用。Western blot  實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，櫻黃素可以通過(guò)抑制 GSK3β 磷酸化的發(fā)生，調(diào)控下游 Bcl-2、Bax 蛋白的表達(dá)，誘導(dǎo) SKOV3 細(xì)胞凋 亡的發(fā)生。該研究揭示了網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)預(yù)測(cè)并指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的科學(xué)性，證實(shí)櫻黃素可通過(guò)阻斷 GSK3β/Bcl-2/Bax 細(xì)胞信 號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路治療卵巢癌，為雞血藤治療卵巢癌的機(jī)制研究提供依據(jù)。